首页> 中文期刊> 《化工学报》 >新型嗜热耐碱脂肪酶的纯化表征及应用

新型嗜热耐碱脂肪酶的纯化表征及应用

         

摘要

将来源于解脂嗜热互营杆菌(Thermosyntropha lipolytica)的脂肪酶(TlLipA)基因tll1导入大肠杆菌BL21(DE3)中表达,通过热处理和镍柱亲和层析获得纯酶,并对其酶学性质进行研究.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示TlLipA分子量为53×103,其最适反应温度为65℃,最适反应pH为8.0.在55~65℃范围内酶活较高且比较稳定;在pH 7.0~11.0于室温保存1 h后,残留相对酶活仍达80%以上.1 mmol/L金属离子Zn2+、Fe3+和试剂SDS,0.05%(质量分数)Tween 80,对酶活力具有强烈的抑制作用,残留相对酶活皆低于15%;1 mmol/L Mg2+、Mn2+对酶活力表现出轻微的激活作用.由底物专一性实验可得,该酶对辛酸对硝基苯酯(C8)和癸酸对硝基苯酯(C10)偏好明显.以棕榈酸对硝基苯酯(p-NPP)为底物,该酶动力学参数Km值为0.23 mmol/L,Vmax为33.50 mmol/(L·min),kcat为22.83 S-1.以重组脂肪酶为催化剂在无溶剂体系中制备生物柴油,含水率20%,酶加量200 U/g油,醇油比为4:1的条件下,在55℃催化大豆油反应48 h,收率可达91.75%.

著录项

  • 来源
    《化工学报》 |2020年第11期|5246-5255|共10页
  • 作者单位

    南京林业大学化学工程学院 江苏南京210037;

    江苏省生物质绿色燃料与化学品重点实验室 江苏南京210037;

    南京林业大学化学工程学院 江苏南京210037;

    江苏省生物质绿色燃料与化学品重点实验室 江苏南京210037;

    南京林业大学化学工程学院 江苏南京210037;

    江苏省生物质绿色燃料与化学品重点实验室 江苏南京210037;

    南京林业大学化学工程学院 江苏南京210037;

    江苏省生物质绿色燃料与化学品重点实验室 江苏南京210037;

    南京林业大学化学工程学院 江苏南京210037;

    江苏省生物质绿色燃料与化学品重点实验室 江苏南京210037;

    南京林业大学化学工程学院 江苏南京210037;

    江苏省生物质绿色燃料与化学品重点实验室 江苏南京210037;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 生物工程学(生物技术);
  • 关键词

    生物催化; 生物柴油; 生物燃料; 脂肪酶; 嗜热耐碱酶; 酶学性质;

相似文献

  • 中文文献
  • 外文文献
  • 专利
获取原文

客服邮箱:kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备:11010802029741号 ICP备案号:京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有
  • 客服微信

  • 服务号