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首页> 中文期刊> 《全科医学临床与教育》 >miRNA-21在胆囊癌中的表达情况及对胆囊癌细胞增殖活性的影响

miRNA-21在胆囊癌中的表达情况及对胆囊癌细胞增殖活性的影响

         
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目的 研究miRNA-21在胆囊癌细胞的表达情况和下调miRNA-21对胆囊癌细胞增殖活性的影响.方法 收集50例胆囊癌患者的肿瘤组织和癌旁正常组织,利用荧光定量PCR(q-PCR)检测胆囊癌组织和正常癌旁组织中miRNA-21的表达水平,再以人胆囊癌细胞株为研究对象,转染miRNA-21 inhibitor下调miRNA-21表达水平,标记为miR-21下调组、空白对照组、阴性对照组,使用MTT法检测转染后细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞周期,细胞划痕检测细胞迁移能力,蛋白质印迹法(Western blot)法检测10号染色体缺失的磷酸酶基因(PTEN)、人凋亡相关因子配体(FasL蛋白)的表达情况,q-PCR技术检测PTEN mRNA、FasL mRNA的表达水平.结果 胆囊癌患者肿瘤组织中miRNA-21表达水平高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(t=16.34,P<0.05).miR-21下调组miRNA-21表达量低于空白对照组和阴性对照组,差异均有统计学意义(t分别=4.86、4.59,P均<0.05);MTT法检测结果显示,接种后24 h、48 h、72 h、96 h、120 h,miR-21下调组细胞的光密度值明显低于空白对照组和阴性对照组,差异均有统计学意义(t分别=4.35、4.55、6.16、7.46、7.90、4.62、4.56、6.19、7.48、7.80,P均<0.05);miR-21下调组停留在G0/G1期的细胞多于空白对照组和阴性对照组(t分别=12.37、13.25,P均<0.05),而S期和G2期细胞少于空白对照组和阴性对照组(t分别=7.06、8.40、5.71、6.02,P均<0.05);细胞划痕实验结果显示miR-21下调组的胆囊癌细胞划痕愈合率明显低于空白对照组和阴性对照组,差异均有统计学意义(t分别=5.77、5.98,P均<0.05);Western-blot结果显示miR-21下调组细胞中PTEN蛋白和FasL蛋白表达量高于空白对照组和阴性对照组,差异均有统计学意义(t分别=19.68、19.60、27.45、26.67,P均<0.05).q-PCR结果表明miR-21下调组细胞中PTEN mRNA和FasL mRNA表达水平高于空白对照组和阴性对照组,差异均有统计学意义(t分别=16.19、16.12、16.09、17.51,P均<0.05).结论 miRNA-21在胆囊癌组织中的上调表达可能是影响胆囊癌细胞增殖和迁移活性的机制之一.

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