缺氧环境下miR-143-5p/HIF-1α信号轴调控人牙髓干细胞促血管生成潜能的机制研究

孟紫君; 何璇; 庞彩凤; 刘春萍; 黄春艳; 陈文霞

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目的探讨氯化钴诱导的化学缺氧对人牙髓干细胞促血管生成潜能的影响及miR-143-5p/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)信号轴在其中的作用。方法体外分离培养人牙髓干细胞,流式细胞术检测细胞表面标志物。使用含不同浓度氯化钴(0、50、100、200μmol/L)的培养基处理细胞24 h或48 h。通过CCK-8和Transwell小室实验检测缺氧对人牙髓干细胞增殖和迁移的影响;qRT-PCR检测miR-143-5p及HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达;Western Blot检测细胞HIF-1α蛋白表达;ELISA检测培养液上清中VEGF浓度。构建过表达miR-143-5p慢病毒(miR-143-5p mimics)、过表达阴性对照(mimics-NC)、沉默miR-143-5p慢病毒(miR-143-5p inhibitor)、沉默阴性对照(inhibitor-NC)载体转染人牙髓干细胞,qRT-PCR检测miR-143-5p及HIF-1α、VEGF mRNA表达。结果原代培养人牙髓干细胞表面抗原CD29、CD90呈阳性表达,CD34、CD45呈阴性表达。50μmol/L组和100μmol/L组细胞增殖活性高于对照组(P<0.01)。50μmol/L组、100μmol/L组和200μmol/L组细胞迁移能力均高于对照组,且100μmol/L组和200μmol/L组高于50μmol/L组(P<0.01)。miR-143-5p表达随着氯化钴浓度的升高而降低(P<0.01);HIF-1α、VEGF mRNA与蛋白表达水平随氯化钴浓度的升高而升高(P<0.01)。与转染mimics-NC比较,转染miR-143-5p mimics人牙髓干细胞HIF-1α、VEGF mRNA表达水平降低(P<0.05,P<0.01);与转染inhibitor-NC比较,转染miR-143-5p inhibitor人牙髓干细胞HIF-1α和VEGF mRNA表达水平升高(P<0.01)。结论氯化钴诱导的化学缺氧可促进人牙髓干细胞血管生成潜能,该作用呈浓度依赖性,miR-143-5p/HIF-1α信号轴可能参与调控该作用机制。

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来源
《临床误诊误治》 |2022年第10期|106-112|共7页
作者
孟紫君; 何璇; 庞彩凤; 刘春萍; 黄春艳; 陈文霞;
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作者单位

广西医科大学口腔医学院/附属口腔医院牙体牙髓科;

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正文语种 chi
中图分类口腔病理学;
关键词
人牙髓干细胞; 氯化钴; 缺氧诱导因子-1Α; 血管内皮生长因子; miR-143-5p;

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