棉花RAPD分析条件优化探讨

左开井; 孙济中

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利用不同的引物、引物浓度、复性温度、ｄＮＴＰｓ浓度、Ｔａｑ酶含量等对棉花品种鄂荆１号、ＰｉｍａＳ－３进行ＲＡＰＤ分析。结果表明，高温复性有利于提高扩增带型的特异性。低Ｍｇ２＋浓度易导致小片断扩增，高Ｍｇ３＋浓度易产生非特异带型。ｄＮＴＰｓ浓度增加导致扩增带型的数目减少。双引物扩增带型与卓引物相比可以检测到更多的品种间遗传差异。根据上述分析，棉花ＲＡＰＤ分析反应物组成为：１Ｘ反应ｂｕｆｆｃｒ、１．８ｍｍｏｌ．Ｌ－１Ｍｇ２＋、０．１６ｍｍｏｌ·Ｌ－１ｄＮＴＰｓ、４０ｎｇＤＮＡ、０．６μｍｏｌ．Ｌ－１随机引物、Ｔａｑ酶１．５单位，加双蒸水至２５μｌ反应体系。

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来源
《棉花学报》 |1997年第6期|304-307|共4页
作者
左开井; 孙济中;
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作者单位

华中农业大学农学系;

华中农业大学农学系;

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原文格式 PDF
正文语种 CHI
中图分类 S562.02;
关键词
棉花; RAPD; 条件优化; 品种;

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