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差速贴壁联合应用5-BrdU对心肌细胞纯度及活力的影响

         

摘要

目的研究多次差速贴壁并联合应用5-溴脱氧尿苷(5-BrdU)对分离的心肌细胞纯度及活性的影响。方法以酶消化法分离乳鼠心肌细胞,分别进行1—3次差速贴壁并联用或不联用5-BrdU以纯化心肌细胞。正常培养3d后,观察细胞的形态特征。用流式细胞技术分析各实验组心肌细胞的纯度。以台盼蓝染色、MTT比色法及细胞线粒体内膜功能检测(流式细胞术)来反映各实验组心肌细胞的活性。结果随着差速贴壁次数的增加,心肌细胞得以纯化,但细胞的活性有所下降。联用5-BrdU后细胞纯度进一步提高,且对细胞的活性无明显影响;其中两次差速贴壁并联合应用5-BrdU后,可获得纯度高、活性好的心肌细胞。结论两次差速贴壁并联合应用5-BrdU为纯化心肌细胞的有效方法。

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