粉尘螨1类变应原T细胞表位重组蛋白的构建及鉴定

祝海滨; 段彬彬; 徐海丰; 徐朋飞; 李朝品

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粉尘螨1类变应原T细胞表位重组蛋白的构建及鉴定

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目的构建Der f1的T细胞表位融合肽基因的原核表达载体并表达鉴定。方法利用基因工程方法构建Der f1的T细胞表位融合肽嵌合基因,命名为Der f1T,并插入到原核表达载体p ET28a(+)中,形成重组原核表达载体p ET28a(+)-Der f1T,进行双酶切和测序验证后的阳性克隆转化到E.coli BL21(DE3)诱导其表达。制样进行SDS-PAGE分析表达产物,再进行纯化,并Western bloting鉴定表达的蛋白。ELISA法测定重组蛋白对粉尘螨过敏的患者血清Ig E抗体的结合能力。结果双酶切和测序结果说明原核表达载体p ET28a(+)-Der f1T构建成功;SDS-PAGE说明Der f1T诱导且纯化成功;Western bloting进一步说明Der f1T蛋白纯化成功;ELISA试验结果说明Der f1T对粉尘螨过敏的患者血清中Ig E结合能力与Der f1相比明显下降(P<0.05)。结论成功表达Der f1的T细胞表位重组蛋白,为后续粉尘螨过敏患者提供特异性免疫治疗奠定基础。

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来源
《中国微生态学杂志》 |2015年第7期|766-769|共5页
作者
祝海滨; 段彬彬; 徐海丰; 徐朋飞; 李朝品;
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作者单位

安徽理工大学医学院病原生物学教研室;

安徽淮南232001;

皖南医学院寄生虫学教研室;

安徽芜湖241002;

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正文语种 chi
中图分类医学免疫学;
关键词
哮喘; 粉尘螨; 特异性免疫治疗; T细胞表位;

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