柯萨奇病毒A6病毒样颗粒的制备及免疫原性初步研究

陈静; 李波; 李鹏飞; 陈易; 吴杰; 王泽鋆; 孟胜利; 申硕

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柯萨奇病毒A6病毒样颗粒的制备及免疫原性初步研究

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手足口病(Hand,foot,and mouth disease,HFMD)是一种常见传染病,以婴幼儿发病为主,柯萨奇病毒A组6型(Coxsackievirus A6,CV-A6)是引起HFMD暴发的主要病原体,其疫苗开发有待深入的研究,而病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)是潜在安全的候选疫苗。为制备CV-A6 VLPs,并研究其免疫原性,本研究利用Bac-toBac昆虫细胞杆状病毒表达系统共表达P1和3CD蛋白,制备并纯化CV-A6 VLPs,应用间接免疫荧光试验(Indirect immunofluscent assay,IFA)、SDS-PAGE、Western Blot、透射电镜法等方法鉴定。以Al(OH)3为佐剂,三种不同剂量CV-A6 VLPs免疫BALB/c小鼠,采用微量中和试验法检测小鼠血清中和抗体滴度。结果显示,重组有P1和3CD的杆状病毒质粒转染Sf9细胞,可形成CV-A6类病毒颗粒,直径约为26nm。SDS-PAGE和Western Blot结果说明P1前体蛋白被3CD作用切割产生了VP0、VP1和VP3,CV-A6 VLPs由这三个病毒结构蛋白构成。小鼠免疫实验结果显示,CV-A6 VLPs可以刺激产生较高水平抗CV-A6的特异性中和抗体,维持至少12周,并且抗体中和效价与免疫剂量和免疫次数呈正相关。本研究获得重组杆状病毒rBac-CV-A6-P1-3CD,并在Sf9细胞内成功表达CV-A6 VLPs,可以刺激小鼠产生较高水平和持久的体液免疫反应。

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来源
《病毒学报》 |2020年第6期|1067-1074|共8页
作者
陈静; 李波; 李鹏飞; 陈易; 吴杰; 王泽鋆; 孟胜利; 申硕;
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作者单位

三峡大学医学院;

宜昌443002;

三峡大学附属仁和医院;

宜昌443003;

武汉生物制品研究所病毒性疫苗研究一室;

武汉430207;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类肠道病毒与肝炎病毒;
关键词
柯萨奇病毒A组6型(CV-A6); 病毒样颗粒(VLPs); 昆虫细胞杆状病毒表达系统;

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