人脐带源间充质干细胞临床输注前的优化制备

李素萍; 杨宏友; 王震; 吕蓉; 郭晓婕; 王超; 邢昕; 刘忠

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目的探讨人脐带源间充质干细胞(HUC-MSCs)临床输注前制备成细胞悬液,细胞活性和细胞表面抗原的变化。方法第3～5代人脐带源间充质干细胞用0.25%胰蛋白酶消化处理,PBS洗涤5次,分别重悬于磷酸盐缓冲液(PBS)或含有50 U/ml肝素-PBS、100 U/ml肝素-PBS、200 U/ml肝素-PBS中,放置于4℃、22℃或37℃条件下,分别延长至1 h、2 h、3 h,检测细胞存活率和细胞表面抗原的变化。结果 HUC-MSCs收集后重悬于PBS中,在4℃条件下,随着在体外放置时间的延长,细胞的存活率在随之下降,但细胞存活率明显高于放置22℃、37℃条件下的细胞。将细胞收集后重悬于含有肝素的PBS溶液中,细胞既无聚集现象,而且随着肝素浓度的增加,细胞的存活率相对较高,体外短暂保存HUC-MSCs的效果较好。在含200 U/ml肝素的PBS溶液中,4℃条件下细胞放置3 h后经苔盼兰染色镜下计数可知,HUC-MSCs存活率可维持在(91.3±3.08)%,而且HUC-MSCs表面仍高表达CD105、CD73、CD44、CD90。结论临床输注前制备HUC-MSCs重悬于含200 U/ml肝素-PBS中在4℃条件下3 h内可供临床有效输注。

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来源
《中国输血杂志》 |2012年第11期|1160-1164|共5页
作者
李素萍; 杨宏友; 王震; 吕蓉; 郭晓婕; 王超; 邢昕; 刘忠;
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作者单位

合肥市中心血站;

安徽合肥230031;

Progenics Cord Blood Cryobank;

中国医学科学院输血研究所;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类免疫细胞生物学;
关键词
间充质干细胞; 肝素; 细胞活性; 临床输注;

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