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lncRNA DLEU2通过调控巨噬细胞M2极化对卵巢癌细胞转移的影响

         

摘要

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)DLEU2对卵巢癌细胞转移的影响。方法 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)实验检测lncRNA DLEU2在卵巢癌组织和卵巢癌细胞SKOV3中的表达,Transwell实验和Western blot分别检测lncRNA DLEU2对SKOV3细胞迁移、侵袭能力以及上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白N-cadherin、Vimentin、E-cadherin表达的影响。用佛波醇肉豆蔻酸乙酸酯(PMA)处理THP-1单核细胞诱导其分化为巨噬细胞。随后使用DLEU2-siRNA、NC-siRNA转染组SKOV3细胞的上清液处理巨噬细胞。收集处理巨噬细胞的条件培养基(CM),用其处理SKOV3细胞。将细胞分为Control组、NC-siRNA+CM组、DLEU2-siRNA+CM组。采用RT-qPCR检测iNOS、CD86、CD163、Arg-1和IL-10mRNA的水平。结果 与癌旁组织和人正常卵巢上皮细胞IOSE80比较,卵巢癌组织和SKOV3细胞中lncRNA DLEU2表达均显著升高(P<0.05)。敲低lncRNA DLEU2可显著抑制SKOV3细胞侵袭、迁移能力以及EMT相关蛋白的表达。M2型巨噬细胞中lncRNADLEU2的表达高于M1型巨噬细胞(P<0.05)。与Control组比较,NC-siRNA+CM组SKOV3细胞侵袭、迁移能力以及EMT相关蛋白的表达显著升高(P<0.05);与NC-siRNA+CM组比较,DLEU2-siRNA+CM组SKOV3细胞侵袭、迁移能力以及EMT相关蛋白的表达显著降低(P<0.05)。结论 敲低lncRNA DLEU2可通过调控M2型巨噬细胞极化抑制卵巢癌细胞转移。

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