草鱼呼肠孤病毒NS31蛋白在昆虫细胞中表达及互作多肽筛选

万偲佳; 喻飞; 吕利群

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草鱼呼肠孤病毒NS31蛋白在昆虫细胞中表达及互作多肽筛选

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草鱼呼肠孤病毒(Grasscarpreovirus,GCRV)是引发病毒性草鱼出血病的主要病原。前期研究证实GCRV-S7基因片段编码NS31蛋白是GCRV的非结构蛋白,在病毒感染的中后期表达。为深入开展NS31的具体生物学功能,本研究从GCRV-JX01株病毒基因组中扩增NS31,克隆至pFastBacHTA载体;利用杆状病毒Bac-to-Bac系统成功表达携带his标签的重组蛋白his-NS31;Western-Blot和IFA实验表明重组杆状病毒能够感染昆虫细胞(Sf9)表达NS31,进一步通过his-Ni2+柱纯化NS31,SDS-PAGE鉴定蛋白约为30KD。运用噬菌体展示技术筛选噬菌体12肽库,研究NS31特异性结合多肽。挑取30个克隆进行DNA序列测定,结果表明NS31主要和2种多肽分子相互作用。进一步结合生物信息学分析表明上述多肽与草鱼基因组中6个基因具有同源性,提示其可能是NS31互作蛋白。本研究为深入探索NS31在病毒感染过程中的生物学功能奠定了重要基础。

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来源
《病毒学报》 |2021年第6期|1448-1458|共11页
作者
万偲佳; 喻飞; 吕利群;
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作者单位

上海海洋大学国家水生动物病原库;

上海201306;

上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室;

上海201306;

上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心;

上海201306;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类病毒性鱼病;
关键词
草鱼呼肠孤病毒(GCRV); NS31蛋白; 噬菌体展示技术; 蛋白质相互作用;

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