甲型流感病毒的逆转录重组酶介导核酸扩增快速检测方法研究

陈淑丹; 罗鹏; 张小平; 蔡玉峰; 何蕾; 郑伟; 吴忠华; 郭利川; 应清界

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目的利用逆转录重组酶介导核酸扩增技术(RT-RAA)建立检测甲型流感病毒的快速方法。方法通过使用逆转录酶,将甲流病毒RNA逆转录为cDNA,根据NCBI基因库中甲型流感病毒保守序列设计引物及探针,用cDNA作模板,进行RT-RAA检测甲型流感病毒;构建携带甲型流感病毒的质粒,检测已知样本,分析该方法的灵敏度和特异性。结果采用甲型流感病毒通用型引物和探针,能有效扩增出相应病毒的核酸,而对其他非甲流病毒无交叉反应;RT-RAA反应过程均在39℃恒温条件下完成,用时30min即可得到扩增结果,反应体系中最低扩增拷贝数为100copies。结论建立的RT-RAA检测甲型流感病毒方法灵敏度和特异性高,反应快速、操作简单,适用于甲型流感病毒通用型的快速检测。

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来源
《中华医院感染学杂志》 |2018年第5期|641-644|共5页
作者
陈淑丹; 罗鹏; 张小平; 蔡玉峰; 何蕾; 郑伟; 吴忠华; 郭利川; 应清界;
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作者单位

浙江国际旅行卫生保健中心;

浙江杭州310003;

浙江出入境检验检疫局;

浙江杭州310016;

江苏奇天基因生物科技有限公司;

江苏无锡214135;

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正文语种 chi
中图分类人体病毒学（致病病毒）;
关键词
甲型流感病毒; 逆转录重组酶介导核酸扩增技术(RT-RAA); 分子检测;

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