治疗用A型肉毒梭菌神经毒素全基因克隆及序列分析

赵雅静; 魏然; 刘晨鸣; 张雪平; 冯德杰; 高雪军; 朱莉萍

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治疗用A型肉毒梭菌神经毒素全基因克隆及序列分析

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目的对我国治疗用A型肉毒毒素生产用菌株Hall株神经毒素(BoNT)全基因进行克隆及序列分析,了解其遗传特性,为该制剂的质量控制提供依据。方法取生产用主代种子、工作种子,通过PCR扩增BoNT全基因片段,将其克隆至载体pGEM-T中,构建重组克隆质粒pGEM-T-BoNT,对克隆的BoNT基因进行序列测定与分析。结果测得的Hall株BoNT全基因序列3891bp,共编码1297个氨基酸。4种核苷酸的比例分别为:A:40.58%,G:16.17%,T:33.13%,C:10.13%;GC含量为26.29%,AT含量为73.71%。主代种子、工作种子核苷酸序列3591位的G变成A,为无义突变,未导致其推导的氨基酸的改变。序列测定结果与GenBank中登录的Hall标准株进行比较,主代种子、工作种子核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为99.99%和100%。结论 A型肉毒梭菌Hall株在实验室长期的保存和生产传代过程中,BoNT基因遗传特性非常稳定。

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来源
《中国生物制品学杂志》 |2010年第6期|598-601|共4页
作者
赵雅静; 魏然; 刘晨鸣; 张雪平; 冯德杰; 高雪军; 朱莉萍;
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作者单位

兰州生物制品研究所质量检定室;

兰州730046;

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正文语种 chi
中图分类基因工程的应用;
关键词
肉毒梭菌A型; 神经毒素类; 克隆; 序列分析;

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