绿原酸对反式二氢二醇环氧苯并a芘诱导的细胞凋亡的保护作用和相关分子机制

吴静; 吴诗佳; 顾心培; 陈汇丰

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[背景]反式二氢二醇环氧苯并[a]芘(BPDE)是一种环境致癌物质,可引起细胞凋亡、氧化应激等多种改变。绿原酸(CGA)具有抗氧化作用,但其对BPDE诱导的细胞凋亡的影响尚不明确。[目的]本研究首先采用BPDE染毒,模拟烟草致支气管上皮细胞损伤,然后采用CGA干预,探索其抗凋亡作用及其潜在分子机制。[方法]预实验采用终浓度为0、25、50、100、150、200μmol/L的CGA分别处理16HBE细胞2、4、8 h。根据预实验结果,选择CGA 50μmol/L预处理细胞4 h后再进行BPDE 0.5μmol/L染毒12 h。实验分为对照组、CGA单独处理组(CGA 50μmol/L)、BPDE单独处理组(BPDE 0.5μmol/L)、CGA干预组(CGA 50μmol/L+BPDE 0.5μmol/L)。采用Annexin V/PI染色及流式细胞仪检测细胞凋亡,荧光探针DCFH-DA法检测细胞内活性氧(ROS)水平,Western blot检测凋亡通路相关蛋白caspase-3的剪切体(Cleaved caspase-3)、caspase-9的剪切体(Cleaved caspase-9)、p53、p21的表达水平。[结果]CGA 50、100μmol/L组各时间点相对细胞活力与对照组相比,差异无统计学意义(P> 0.05);而150、200μmol/L组处理时长为8 h时,与对照组相比细胞活力下降(P <0.05)。与BPDE单独处理组相比,CGA干预组的细胞凋亡率下降(17.63%vs 9.21%,P <0.05),Cleaved caspase-3(1.81 vs 1.34,P <0.05)和Cleaved caspase-9(2.13 vs 1.37,P <0.05)蛋白相对表达量下降,二氯荧光素荧光强度下降(250.21±8.13 vs 199.14±6.74,P <0.05),p53(1.66 vs 1.25,P <0.05)及p21(1.64 vs 1.23,P <0.05)蛋白表达量也下降。[结论]本研究证实CGA可以抑制BPDE诱导的16HBE细胞凋亡,降低胞内ROS的水平。这种抗凋亡作用可能与caspase-9/caspase-3介导的内源性线粒体途径和抑制BPDE诱导的p53和p21的蛋白表达有关。

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来源
《环境与职业医学》 |2019年第9期|818-823|共6页
作者
吴静; 吴诗佳; 顾心培; 陈汇丰;
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作者单位

上海中医药大学护理学院;

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正文语种 chi
中图分类卫生毒理;
关键词
反式二氢二醇环氧苯并a芘; 绿原酸; 细胞凋亡; 活性氧; p53; p21;

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