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高尿酸通过激活钙蛋白酶加重缺血/缺氧条件下小鼠心肌细胞凋亡

         

摘要

目的:研究高尿酸对缺血/缺氧条件下心肌细胞的影响及钙蛋白酶(Calpains)在其中的作用。方法:将小鼠心肌细胞系分为3组:0μmol/L尿酸+缺血/缺氧组(单纯缺血/缺氧组);600μmol/L尿酸+缺血/缺氧组;1 200μmol/L尿酸+缺血/缺氧组,通过流式细胞技术检测各组心肌细胞凋亡比例,并进一步将凋亡比例明显增加的实验组分为:1 200μmol/L尿酸+缺血缺氧组;MDL28170+1 200μmol/L尿酸+缺血缺氧组。采用DHE染色法与ELISA试剂盒测定心肌细胞中活性氧簇(ROS)水平,q-PCR法及Western blot检测心肌细胞中Calpain1、Calpain2、Calpastatin的表达情况。结果:高尿酸可明显增加缺血/缺氧状态下心肌细胞凋亡水平(P<0.05)。与单纯缺血/缺氧组相比,高尿酸显著增加了Calpain1/2的表达,明显抑制了Calpastatin的表达(P<0.05),同时显著增加了心肌细胞中ROS的水平(P<0.05),而在加入MDL28170干预后,心肌细胞的ROS水平及凋亡比例均有所降低(P<0.05)。结论:高尿酸通过激活Calpain所介导的氧化应激反应加重缺血/缺氧状态下心肌细胞凋亡。

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