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水稻条纹病毒NS2和NS3基因共干扰转基因水稻的培育及抗病性分析

         

摘要

NS2和NS3是水稻条纹病毒编码的两个转录后基因沉默抑制子,沉默抑制子往往与病毒致病性相关。本研究利用重叠PCR方法将NS2和NS3基因的部分cDNA片段重组后连接到RNAi载体,并借助PstⅠ将其重组到植物表达载体PXQ上;通过农杆菌介导法侵染水稻日本晴种子的愈伤组织,经新霉素(G418)抗性筛选获得31株转基因植株。对T0代转基因植株进行PCR及Southern blot分析结果显示,目的基因已成功转入水稻基因组中,并且不同转化植株含有目的基因的拷贝数不同;抗病性实验表明,与野生型植株相比,T0代转基因水稻能推迟RSV发病时间10~20d,导致病毒积累量下降30%~50%,且其下降量与发病时间延迟有相关性。

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