• 主题
高级搜索  >
历史搜索 清空历史
首页> 中文期刊> 《中国职业医学》 >Suv39h1基因RNA干扰慢病毒载体构建与验证

Suv39h1基因RNA干扰慢病毒载体构建与验证

         
页面导航
  • 摘要
  • 著录项
  • 相似文献
  • 相关主题

摘要

目的 构建色斑3-9抑制因子同源物1(Suv39h1)的RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,通过转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)验证其干扰效果。方法 根据Suv39h1的基因序列和短发夹RNA序列设计原则,设计合成构建RNAi质粒的寡核苷酸,构建KD1、KD2、KD3 3种不同慢病毒敲低靶点的LV-Suv39h1-RNAi重组质粒。经酶切及测序正确后,将包装好的3种Suv39h1基因低表达慢病毒载体转染对数生长期的大鼠BMSCs,设为KD1、KD2、KD3转染组,并设转染阴性对照病毒的对照组。转染72 h后,鉴定转染效率,并采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)法检测4组细胞中Suv39h1的mRNA相对表达水平。结果 测序结果表明成功构建3种LV-Suv39h1-RNAi重组质粒。慢病毒载体转染效率鉴定结果显示:当感染复数为20时,3种慢病毒载体转染后的BMSCs均有80.00%以上表达绿色荧光;表明慢病毒构建成功,且转染效率高。qPCR检测结果显示:KD1、KD2、KD3转染组BMSCs中Suv39h1 mRNA相对表达水平均低于对照组(P值均0.05)。结论 成功构建Suv39h1基因低表达慢病毒载体;该载体可在大鼠BMSCs中表达,为研究Suv39h1基因在急性髓系白血病中的作用奠定了基础。

著录项

相似文献

  • 中文文献
  • 外文文献
  • 专利
获取原文

客服邮箱：kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备：11010802029741号 ICP备案号：京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有

  • 客服微信

  • 服务号