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利用免疫沉淀法对鸡源志贺菌IpaC蛋白受体候选蛋白的初步筛选

         

摘要

为筛选鸡源志贺菌IpaC蛋白的受体。利用生物素标记试剂盒标记IpaC蛋白,分离培养原代鸡肠上皮细胞和。利用ProteoExtract?天然膜蛋白提取试剂盒提取鸡肠上皮细胞的膜蛋白;应用免疫沉淀、免疫磁珠法分离富集与IpaC蛋白结合的蛋白质;利用SDS-PAGE电泳检测和Western blot鉴定。结果获得了与IpaC蛋白特异性结合的大约在34000~55000之间的蛋白条带。筛选得到的SDS-PAGE蛋白条带进行LC—MS/MS测序鉴定和生物信息学分析。初步将annexin A2,37000 Laminin receptor precursor,LIM and SH3 proteinl,ras—related protein Rab-43作为IpaC蛋白受体的候选蛋白。为研究志贺菌在鸡体内的致病机制奠定基础,而且可以为评估鸡源志贺菌在公共卫生方面的重要性提供参考依据。

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