琯溪蜜柚高分量核DNA提取方法的建立

潘腾飞; 陈桂信; 潘东明

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琯溪蜜柚高分量核DNA提取方法的建立

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以琯溪蜜柚[Citrus grandis(L.)Osbeck'Guanximiyou']叶片为材料,比较了两种提取方法对高分子量核DNA(HMW-DNA)制备效果的影响。结果表明,改良Zhang法与Peterson法相比,前者更适合于琯溪蜜柚HMW-DNA的提取。改良Zhang法用温和的物理方法破碎细胞壁,在一定的渗透压下保证细胞核的完整性,运用miracloth和低速离心去除大部分的多糖和细胞壁碎片,经显微观察,所提取的细胞核完整、纯净、质量高;将这些细胞核用低熔点琼脂糖包埋,以琼脂糖小块的方式保存细胞核,以保持核的稳定;琼脂糖小块的最适消化时间为48h,脉冲场凝胶电泳分析结果表明所获得的HMW-DNA大于1Mb,这些核DNA能够被限制性内切酶消化,适合于琯溪蜜柚BAC基因组文库的构建。

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来源
《园艺学报》 |2010年第5期|835-840|共6页
作者
潘腾飞; 陈桂信; 潘东明;
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作者单位

福建农林大学园艺产品贮运保鲜研究所;

园艺学院;

福州350002;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类柚（文旦）;
关键词
柚; 高分子量核DNA; BAC文库; 脉冲场电泳;

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