过表达LKB1基因增加子宫内膜癌对顺铂敏感性的作用及机制研究

陈烨; 李虎; 朱明慧

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目的肝激酶基因B1(The liver kinase B1,LKB1)对子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)细胞顺铂(Cisplatin,DDP)化疗敏感性的影响及作用机制。方法qRT-PCR检测LKB1在DDP耐药EC细胞株Ishikawa/DDP及子EC细胞株Ishikawa中的表达情况。过表达质粒转染Ishikawa/DDP细胞,分为oe-NC组和oe-LKB1组,MTS检测各组细胞对DDP的敏感性;Hoechst 33342凋亡染色检测DDP处理各组细胞后细胞发生凋亡变化;流式细胞仪检测DDP处理各组细胞后细胞凋亡率变化;LKB1过表达重组慢病毒及其阴性对照空载以MOI=(病毒滴度×病毒体积)/细胞数目为20分别感染Ishikawa/DDP细胞,经1.0μg/mL G418(遗传霉素)筛选,成功构建稳定过表达LKB1(oe-LKB1)或对照(oe-NC)的Ishikawa/DDP细胞,注射到BALB/c裸鼠中构建裸鼠移植瘤模型,每天给予DDP 3mg/kg灌胃,观察各组肿瘤体积变化;Western-blot法检测DDP处理各组细胞后细胞中p-AMPK、p-mTOR和Bcl-2蛋白的表达。结果qRT-PCR结果LKB1 mRNA在DDP耐药EC细胞株Ishikawa/DDP中的表达为0.32±0.06,显著低于EC细胞株Ishikawa中的表达1.00±0.10;MTS检测结果显示过表达LKB1后DDP作用于Ishikawa/DDP的IC50值降低,对DDP的敏感性增加;Hoechst 33342凋亡染色结果显示过表达LKB1后DDP处理的细胞Hoechst 33342染色阳性细胞增多;流式细胞仪结果显示过表达LKB1后DDP处理的细胞凋亡率增加;裸鼠移植瘤模型结果显示过表达LKB1后DDP灌胃的裸鼠肿瘤体积减小;Western-blot检测发现过表达LKB1后DDP处理的细胞中p-AMPK表达增多、p-mTOR和Bcl-2蛋白表达降低(P均<0.05)。结论LKB1基因可能通过抑制AMPK/mTOR信号通路作用于Bcl-2凋亡蛋白,增加EC对DDP的化疗敏感性。

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来源
《中国优生与遗传杂志》 |2020年第8期|919-923|共5页
作者
陈烨; 李虎; 朱明慧;
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作者单位

广州市番禺中心医院妇科;

广东广州510000;

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正文语种 chi
中图分类子宫肿瘤;
关键词
肝激酶基因B1; 子宫内膜癌; 顺铂; 化疗敏感性;

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