液相串联质谱法同时定量检测生物样本中鞘脂类化合物

郭守东; 于杨; 冯蕾; 张颖; 崔英杰; 秦树存

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鞘脂类中的主要活性分子鞘氨醇1-磷酸(S1P),可通过介导细胞增殖、分化和迁移等发挥广泛的生物学功能;同时,S1P可在相关酶的作用下转变为其它形式.本文旨在建立一种简便的鞘脂类的制备方法,并结合液相串联质谱(LC-MS/MS)快速检测生物样本中纳克水平的鞘脂类化合物.采用甲醇沉淀或经典的脂质提取方法获得鞘脂类化合物,再采用LC-MS/MS在多反应监测模式(MRM)下进行定量分析.实验结果表明,甲醇沉淀法可简便快捷地获得血浆或脂蛋白中鞘氨醇类化合物;S1P、二氢鞘氨醇(DH-S1P)和鞘氨醇(SPH)的定量限分别为110.5、215.6和44.3 pg;人血浆中S1P、DH-S1P和SPH的含量分别为257.8±49.4 nmol/L、93.5±17.3 nmol/L和44.6±7.4nmol/L,鞘脂类化合物在人血浆脂蛋白上的分布存在显著性差异;在ApoE-/-小鼠血浆中S1P、DHS1P和SPH的含量分别为590.1±78.2 nmol/L、197.8±60.6 nmol/L和35.4±16.7 nmol/L;每1×106个人脐静脉内皮细胞(EA.hy926)中,S1P和SPH的含量分别为103.7±21.8 pg和16.3±5.3ng.甲醇沉淀法结合LC-MS/MS可简便快捷地对血浆和脂蛋白中的鞘脂类化合物进行定量检测.该方法特别适用于大量生物样本中鞘脂类的快速定量分析.

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来源
《中国生物化学与分子生物学报》 |2013年第11期|1082-1087|共6页
作者
郭守东; 于杨; 冯蕾; 张颖; 崔英杰; 秦树存;
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作者单位

山东省高校动脉粥样硬化重点实验室;

泰山医学院动脉粥样硬化研究所;

山东泰安271000;

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正文语种 chi
中图分类生物化学;
关键词
鞘脂; 液相串联质谱; 生物样本;

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