TaqMan探针实时PCR检测人MTHFR基因C677T多态性方法的建立

王苏梅; 王克华; 魏斌; 于建春; 盖凌; 董云玲; 吕雪梅; 刘锦云

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目的建立TaqMan探针实时PCR检测人MTHFR基因C677T多态性的方法。方法设计一对MTHFR基因C677T多态位点的引物及TaqMan探针,采用TaqMan探针实时PCR扩增SNP分型方法检测唇腭裂患者及其父母共100人的MTHFR基因C677T多态性,与常规PCR-RFLP方法进行一致率比较,并对其特异性、敏感性和重复性以及成本-效益等进行评价,同时对部分实时PCR产物样本进行测序验证。结果运用TaqMan探针实时荧光PCR技术对MTHFR基因C677T多态性检测结果准确,特异性好,与常规PCR-RFLP方法结果具有高度一致性,Kappa=0.922>0.75(P=0.000);检测灵敏度可达2×103拷贝;重复性好、高通量、无污染、安全性好;随机样品TaqMan探针分型结果与测序结果完全一致。结论成功建立了TaqMan探针实时PCR检测人MTHFR基因C677T多态性的方法;此方法是常规临床诊断及大规模群体研究的良好平台。

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来源
《中国优生与遗传杂志》 |2012年第9期|11-14|共4页
作者
王苏梅; 王克华; 魏斌; 于建春; 盖凌; 董云玲; 吕雪梅; 刘锦云;
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作者单位

山东省计划生育科学技术研究所山东省优生技术重点实验室;

济南250002;

山东中医药大学附属医院;

济南250012;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 R440;
关键词
TaqMan探针; 实时荧光PCR; 单核苷酸多态性; 亚甲基四氢叶酸还原酶; C677T突变; 聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性; 非综合征性唇腭裂;

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