无血清悬浮培养CHO-K1-SFS细胞系的建立及其生物学特性

杨妍梅; 冯若飞; 谢晶莹; 李向茸; 王丹; 马忠仁

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无血清悬浮培养CHO-K1-SFS细胞系的建立及其生物学特性

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目的建立无血清悬浮培养CHO-K1-SFS细胞系,并检测其生物学特性。方法将CHO-K1贴壁细胞通过逐步降低血清浓度,获得低血清CHO-K1贴壁细胞,以3×105个/ml接种于含无血清培养基SFM4CHO的150 ml三角瓶中,摇床无血清适应培养,获得CHO-K1-SFS细胞。对该细胞进行生长曲线绘制、微生物污染检测、代谢分析及外源基因表达检测。结果所获得的CHO-K1-SFS细胞系可无血清悬浮培养,以3×105个/ml的初始密度接种,最大增殖浓度可达3.8×106个/ml,平均倍增时间为29.7 h;无细菌、真菌、病毒和支原体污染;对葡萄糖利用率较高,乳酸产生较多;能较好地表达外源基因。结论成功建立了无血清悬浮培养CHO-K1-SFS细胞系,为建立高效的外源基因表达平台奠定了基础。

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来源
《中国生物制品学杂志》 |2014年第2期|180-184|共5页
作者
杨妍梅; 冯若飞; 谢晶莹; 李向茸; 王丹; 马忠仁;
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作者单位

西北民族大学生物工程与技术国家民委重点实验室;

甘肃兰州730030;

西北民族大学生命科学与工程学院;

甘肃兰州730030;

甘肃省动物细胞工程技术研究中心;

甘肃兰州730030;

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正文语种 chi
中图分类细胞学实验与细胞学研究方法;免疫学技术、设备及实验方法;
关键词
CHO-K1细胞; 无血清培养; 悬浮培养; 生物学特性;

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