益肾通络方对苯并(a)芘致精子DNA损伤模型小鼠睾丸靶基因影响的多组学研究

赵莉娜; 张宸铭; 马思成; 孙自学; 门波

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目的探讨益肾通络方对精子DNA损伤的影响及可能作用机制。方法40只ICR小鼠随机分为空白组,模型组和益肾通络方低、中、高剂量组,每组8只。除空白组外其余各组按100 mg/(kg·d)灌胃苯并(a)芘复制精子DNA损伤模型,益肾通络方低、中、高剂量组上午造模,下午分别给予益肾通络方水煎液5.95、11.89、23.78 g/(kg·d)灌胃,空白组和模型组同时灌胃0.1 ml/10 g生理盐水,各组均持续8周。检测各组小鼠精子DNA碎片指数(DFI),根据DFI结果进行睾丸转录组学和蛋白组学分析,对两组学的结果进行趋势分析、GO分析和KEGG富集通路分析。采用九象限法筛选益肾通络方作用靶基因,并采用Western blot法进行验证。结果模型组小鼠精子DFI明显高于空白组(P0.05),故对空白组、模型组、益肾通络方高剂量组进行转录组学和蛋白组学分析。结果显示,共筛选出1272个差异基因(DEGs)和1309个差异蛋白(DEPs)。趋势分析筛选出8种趋势类型,其中谱2为模型组表达下调,益肾通络方干预后恢复的基因/蛋白;谱5为模型组表达上调,益肾通络方干预后恢复的基因/蛋白。因此,选择对谱2和谱5中的基因或蛋白进一步分析。GO分析显示,在生物学过程、细胞成分、分子功能类别中排第一位分别是发育过程、细胞内部分、分子功能监管。谱2和谱5中基因KEGG富集通路前五位分别为铂类药物抗药性、破骨细胞分化、多种细胞凋亡、凋亡及非酒精性脂肪肝疾病,蛋白KEGG通路前五个通路分别为系统性红斑狼疮、氮代谢、蛋白消化吸收、非洲锥虫病和B细胞受体信号通路。九象限法筛选出X线交叉互补修复基因1(Xrcc1)、细胞色素b5还原酶3(Cyb5r3)、血红素结合蛋白1(Hebp1)、丝氨酸蛋白酶45(Prss45)为益肾通络方靶基因。经Western blot验证,与空白组比较,模型组小鼠睾丸组织Xrcc1及Prss45蛋白表达显著下调(P<0.05)。益肾通络方高剂量组Xrcc1蛋白表达较模型组显著上调(P<0.01)。结论益肾通络方可修复由苯并(a)芘染毒引起的精子DNA损伤,其机制可能与耐药、凋亡等通路及Xrcc1有关。

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来源
《中医杂志》 |2023年第8期|827-834|共8页
作者
赵莉娜; 张宸铭; 马思成; 孙自学; 门波;
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作者单位

河南中医药大学第二临床医学院;

河南省郑州市450046;

河南省中医院;

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正文语种 chi
中图分类中药实验药理;
关键词
精子; DNA损伤; 益肾通络方; 苯并(a)芘; 转录组学; 蛋白组学;

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