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逆转录多重PCR检测人感染高致病禽流感H5N1亚型

         

摘要

目的建立并优化检测人感染高致病禽流感H5N1亚型的逆转录多重PCR(RT-MPCR)方法。方法将提取H5N1型高致病禽流感病毒RNA,逆转录为cDNA,测序后针对H5裂解位点及N1的保守区序列设计特异性引物,应用RT-MPCR对H5N1型基因进行检测,并验证所建立方法的敏感性,通过检测NDV、IBV和IBDV的RNA病毒验证其特异性。结果测序结果表明该株H5N1型与安徽株同源,经RT-MPCR扩增出302bp和567bp的两条片段,实验最低检出限为0.500pg的RNA病毒,并且特异性高。结论该法可用于人感染高致病性禽流感病毒H5N1亚型的检测。

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