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顶头孢霉菌原生质体的制备和再生条件的优化

         

摘要

考察了细胞壁降解酶的种类、酶解时间、培养基种类和涂布方式对顶头孢霉原生质体制备和再生的影响,结果提示顶头孢霉菌丝形态对原生质的制备和再生也有重要影响。顶头孢霉生长过程可分为3个时期:细长时期、中度膨大时期和高度膨大时期。本试验利用显微图像分析法确定了各时期菌丝的形态参数,描述了培养过程中的菌丝形态变化规律,以及不同菌丝形态对原生质体释放和再生率的影响。最终优化条件为:选择中度膨大初期的菌丝体,使用1%溶壁酶,30℃酶解2 h后采用双层平板法接种于原生质体再生培养基I(HCM)中。每1 ml原生质体悬浮液中原生质体的释放数可达2.51×10^8个,再生率大于20%。

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