可溶性重组hTRAIL蛋白抑制U251细胞生长

颜世君; 吴云舟; 高振秋; 叶贤龙; 张巧; 何金娇; 任桂萍; 李德山

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可溶性重组hTRAIL蛋白抑制U251细胞生长

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肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)是TNF超家族中的成员,能够广泛诱导肿瘤细胞凋亡,对正常细胞无明显毒副作用.TRAIL已成为肿瘤治疗领域的研究热点.人脑胶质瘤是神经系统肿瘤中最常见类型,占颅内肿瘤50%～60%,5年存活率为20%～30%.本研究探讨可溶性TRAIL蛋白对人脑胶质瘤细胞(U251)的抑制作用.由大肠杆菌表达系统表达的TRAIL多为包涵体,为获得可溶性的蛋白,将hTRAIL95～281功能区基因片段插入到pHisSUMO表达载体,经IPTG低温诱导表达,Ni-NTA Agarose纯化后获得可溶性SUMO-hTRAIL,经SUMO ProteaseⅠ切去SUMO融合标签后获得成熟可溶hTRAIL蛋白.以U251细胞为靶细胞,通过MTT法检测TRAIL对肿瘤细胞的抑制作用.结果证明,TRAIL对U251细胞的抑制呈剂量依赖关系,最大抑制率为53.9%.流式细胞仪检测TRAIL诱导U251细胞凋亡实验中,对照组细胞存活率为92.2±0.8%,实验组细胞存活率为35.5±1.2%,证明重组蛋白具有生物学活性,并在体外能明显诱导U251肿瘤细胞发生死亡.本研究结果为TRAIL蛋白在临床上应用于肿瘤治疗奠定了基础.

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来源
《中国生物化学与分子生物学报》 |2011年第7期|658-663|共6页
作者
颜世君; 吴云舟; 高振秋; 叶贤龙; 张巧; 何金娇; 任桂萍; 李德山;
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作者单位

东北农业大学生命科学学院生物制药教研室;

黑龙江哈尔滨150030;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;
关键词
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体; SUMO; 肿瘤治疗; 细胞凋亡;

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