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首页> 中文期刊> 《中国优生与遗传杂志》 >缺氧对滋养细胞HTR-8/SVneo自噬的影响及机制研究

缺氧对滋养细胞HTR-8/SVneo自噬的影响及机制研究

         
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目的 探索缺氧对子痫前期滋养细胞HTR-8/SVneo自噬的影响及可能机制。方法 收集80例子痫前期、50例正常孕妇胎盘组织。选取HTR-8/SVneo(NC组),构建缺氧/复氧(H/R)模型(H/R组),转染pcDNA3.1-低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP6),并用自噬抑制剂Baf-A1、β-catenin抑制剂PKF115-584处理。分为pcDNA3.1-NC组、pcDNA3.1-LRP6组、pcDNA3.1-LRP6+Baf-A1组、pcDNA3.1-LRP6+PKF115-584组。自噬双标腺病毒(mRFP-GFP-LC3)观察自噬流,反转录PCR(RT-PCR)检测LRP6基因mRNA水平,Westernblot检测自噬相关蛋白3I(LC3-I)、自噬相关蛋白3Ⅱ(LC3-Ⅱ)、Beclin1、LRP6、Unc-51-like autophagy activating kinase 1(ULK1)、β-catenin、c-Myc、Rab7及p62蛋白水平,免疫组化检测胎盘组织中LRP6表达。结果 子痫前期孕妇胎盘组织LRP6阳性率、LRP6基因mRNA表达水平低于对照组(P<0.01)。H/R组细胞LRP6基因mRNA、蛋白水平低于NC组(P<0.01)。NC组、pcDNA3.1-LRP6组细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin1、ULK1蛋白水平高于H/R组、pcDNA3.1-NC组,p62蛋白水平低于H/R组、pcDNA3.1-NC组(P<0.01),NC组、pcDNA3.1-LRP6组细胞自噬流水平高于H/R组、pcDNA3.1-NC组。pcDNA3.1-LRP6+Baf-A1组、pcDNA3.1-LRP6+PKF115-584组细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin1、ULK1蛋白水平低于pcDNA3.1-LRP6组,p62蛋白水平高于pcDNA3.1-LRP6组(P<0.05)。pcDNA3.1-LRP6组、pcDNA3.1-LRP6+PKF115-584组细胞Rab7、c-Myc及β-catenin蛋白水平高于pcDNA3.1-NC组(P<0.05)。结论 缺氧诱导的LRP6通过调控Wnt/β-catenin通路促进Rab7介导的子痫前期滋养层细胞自噬。

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