疫苗中聚肌胞的分离测定

刘莉莎; 范慧红

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目的采用两步水解及反相高效液相色谱法(reversed phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)分离测定疫苗中聚肌胞(polyinosinic-cytidylic acid,PIC)成分。方法对经蛋白酶K消化、饱和酚抽提、乙醇沉淀回收的含有PIC成分的狂犬病疫苗样品采用KOH碱水解及碱性磷酸酶水解2、6、10 h后,采用RP-HPLC法检测疫苗中的PIC成分,色谱条件:色谱柱Xtimate HPLC Column(C18,4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙酸铵溶液-甲醇(96∶4),流速:0.8 ml/min;紫外检测波长:254 nm;柱温:25℃;进样量:5μl。结果 PIC经碱性磷酸酶不同时间水解,确定最佳水解时间为6 h;疫苗中的PIC成分被成功分离成肌苷峰和胞苷峰,且分离度良好。结论两步水解及RP-HPLC法可成功分离出疫苗中的PIC成分,为疫苗的质量控制及监管提供参考。

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来源
《中国生物制品学杂志》 |2014年第2期|251-253|共3页
作者
刘莉莎; 范慧红;
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作者单位

中国食品药品检定研究院;

北京100050;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类有机定量分析;免疫学技术、设备及实验方法;
关键词
聚肌胞; 高效液相色谱法; 碱性磷酸酶; 狂犬病疫苗;

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