BAFF蛋白特异性核酸适配体的筛选与鉴定

郭娜燕; 陈文标; 陈荫楠; 陈榕生; 林俊生

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BAFF蛋白特异性核酸适配体的筛选与鉴定

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系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是我国最常见的自身免疫性疾病。B细胞活化因子(B cell activating factor,BAFF)是SLE治疗和检测的重要靶标。发展针对BAFF的经济高效的新型分子识别元件具有重要意义。利用指数富集配体系统进化(systematic evolution of ligands exponential enrichment,SELEX)体外筛选技术,从78 nt的单链DNA随机文库中筛选BAFF蛋白的核酸适配体。经过10轮筛选,高通量测序分析后,采用斑点印迹、Eastern印迹、酶联寡核苷酸吸附实验(enzyme-linked oligonucleotide assay,ELONA)检测,核酸适配体Apt 7和Apt 12可特异性识别BAFF蛋白,解离常数分别为241.00±19.75 nmol/L和413.51±46.94 nmol/L。经分子对接分析,将核酸适配体Apt 7截短为Apt 7~1,解离常数为192.10±28.61 nmol/L。联合核酸适配体Apt 7~1与BAFF抗体建立夹心ELONA法检测BAFF蛋白,检测限为0.227 nmol/L。该研究为BAFF蛋白检测和拮抗剂研究提供了新的分子识别元件。

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来源
《中国生物化学与分子生物学报》 |2020年第12期|1498-1507|共10页
作者
郭娜燕; 陈文标; 陈荫楠; 陈榕生; 林俊生;
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作者单位

泉州医学高等专科学校基础医学部;

福建泉州362011;

华侨大学医学院;

福建泉州362021;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 K329.7;
关键词
B细胞活化因子; 核酸适配体; 高通量测序; 指数富集配体系统进化;

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