犬细小病毒Taq Man荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用

刘海防; 胡传伟; 谢之景; 姜世金; 张兴晓; 倪长鹏; 贾赟; 杨笃宝

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犬细小病毒Taq Man荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用

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根据GenBank中CPV VP2蛋白基因序列,选择CPV VP2基因保守序列,分别设计1对特异性引物和TaqMan探针,建立了CPV Taq Man荧光定量PCR检测方法。对CPV Taq Man荧光定量PCR的反应体系和反应条件进行优化,并对其特异性和敏感性进行了测定,建立标准曲线。结果,CPV Taq Man荧光定量PCR对CPV检测阳性,并能对10拷贝/μL的CPV模板检测阳性,标准曲线的相关系数为0.9992,但对非CPV模板检测阴性。结果表明,所建立的CPV Taq Man荧光定量PCR具有很好的特异性和敏感性,标准曲线具有很强的实用性。同时对CPV Taq Man荧光定量PCR与CPV PCR进行了比较试验,结果前者比后者的敏感性高100倍。采用CPVHA、CPV PCR与CPV Taq Man荧光定量PCR对55份临床样品进行检测,CPV HA对30份样品检测阳性,CPVPCR对40份样品检测阳性,CPV Taq Man荧光定量PCR对47份样品检测阳性。这表明,CPV Taq Man荧光定量PCR对样品的检出率最高,具有特异、敏感、快速的特点,适用临床样品的检测。

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来源
《中国兽医学报》 |2010年第5期|593-596|共4页
作者
刘海防; 胡传伟; 谢之景; 姜世金; 张兴晓; 倪长鹏; 贾赟; 杨笃宝;
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作者单位

山东农业大学动物科学院;

山东泰安271018;

辽宁出入境检验检疫局技术中心;

辽宁大连116001;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类家畜病毒学;
关键词
犬细小病毒; 实时定量PCR; Taq; Man荧光探针;

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