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X射线对小胶质细胞M1和M2型极化的影响

         

摘要

目的探讨X射线对小鼠小胶质BV-2细胞极化的影响。方法取对数生长期BV-2细胞随机分为假照射组(Sham)和10 Gy照射组,后者给予X射线单次照射,剂量为1.28 Gy/min,照射时间7 min 49 s。于照射后1、3、6、24 h和48 h,光镜下观察并分析BV-2细胞活化率;HE染色及Iba-1免疫荧光染色观察BV-2细胞形态;ELISA检测BV-2细胞培养液上清中M1型活化标志物TNF-α、IL-1β和M2型活化标志物TGF-β1水平变化;Western blotting检测BV-2细胞M1型(CD86、iNOS)和M2型(CD206)极化相关蛋白水平变化。结果形态学结果显示,10 Gy X射线照射后细胞出现胞体变大、突起变粗变短,呈"阿米巴"样改变。与Sham组相比,10 Gy照射后3 h BV-2细胞活化率即明显升高,并在照后6 h达到高峰,48 h开始恢复;ELISA结果显示,TNF-α和TGF-β1水平在照后48 h时均明显升高;IL-1β水平在照后3~6 h出现一过性降低趋势,在照后24 h开始增高,至照后48 h达到高峰;Western blotting结果显示,CD86蛋白水平在照后各时间点无显著变化,iNOS蛋白表达水平在照后1、6、24 h和48 h显著增高;CD206在照后3 h出现先降低后升高交替波动性变化。结论10 Gy X射线单次照射可诱导离体培养的BV-2细胞激活,其极化类型随照后时间的不同而变化。

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