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补肾健脾方含药血清对乙型肝炎病毒感染后树突状细胞亚群的影响

         

摘要

目的 探讨补肾健脾方对不同载量乙型肝炎病毒(HBV)感染后树突状细胞(DC)亚群抑制状态的影响。方法 分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),采用SD大鼠制备空白及补肾健脾方含药血清,采用HepG 2.2.15细胞株制备HBV病毒液。分为低病毒刺激(病毒浓度为1×10~5 IU/孔)和高病毒刺激(病毒浓度为1×10~7 IU/孔)实验。低病毒刺激实验每组设6个复孔,每孔细胞为1×10~6,分为正常组一、低病毒组(病毒浓缩液1μl)、空白血清组一(病毒浓缩液1μl+10%空白血清200μl)、补肾健脾方含药血清组一(病毒浓缩液1μl+10%补肾健脾方含药血清200μl);高病毒刺激实验每组设6个复孔,每孔细胞为1×10~6,分为正常组二、高病毒组(病毒浓缩液100μl)、空白血清组二(病毒浓缩液100μl+10%空白血清200μl)、补肾健脾方含药血清组二(病毒浓缩液100μl+10%补肾健脾方含药血清200μl)。两个实验均在干预12、24、36、48 h时采用流式细胞仪检测各组DC亚群髓样树突状细胞(mDC)和浆细胞样树突状细胞(pDC)含量。结果低病毒刺激实验中,补肾健脾方含药血清组一各时间mDC、pDC含量均高于同时间点空白血清组一、低病毒组(P<0.05);补肾健脾方含药血清组一mDC含量本组各时间点比较差异均无统计学意义(P>0.05),pDC含量12 h、24 h时较本组36 h、48 h低(P<0.05)。高病毒刺激实验中,补肾健脾方含药血清组二各时间mDC、pDC含量均高于同时间点空白血清组二和高病毒组(P<0.05);补肾健脾方含药血清组二pDC含量12 h、24 h时较本组36 h、48 h低(P<0.05),mDC含量36 h时较12 h、24 h低,48 h时较12 h低(P<0.05)。不同载量HBV刺激12、24、36、48 h时,高病毒组及低病毒组mDC、pDC含量均随干预时间延长而降低(P<0.05);高病毒组各时间mDC含量均低于同时间点低病毒组(P<0.05),pDC含量仅12 h时低于低病毒组(P<0.05)。结论 补肾健脾方含药血清可改善HBV对DC亚群的抑制,提高mDC、pDC含量进而增强机体对HBV的免疫应答。

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