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西瓜新炭疽病病原菌分子鉴定及其生物学特性初探

         

摘要

探究湘西地区西瓜炭疽病致病种类,为西瓜炭疽病防控提供理论依据。以湘西民族职业技术学院科技园种植的西瓜病叶为研究对象,对该病的病原菌进行分离提纯、形态学观察、柯赫氏法则验证、18S rDNA-ITS序列分析以及生物学特性研究。菌株C913菌落呈圆形,菌丝绒毛状,排列整齐,初为白色,后渐为灰白色。轮状排列分生孢子盘,并有橘红色分生孢子团。分生孢子圆柱形,两端钝圆,单胞,中间有隔,大小(9.8~17.5)μm×(4.5~5.9)μm。18S rDNA序列与GenBank中收录的4个胶孢炭疽菌相似性达到100%。其菌丝在温度为10~37℃时均能生长正常,但25℃时菌丝生长速度最快,菌落直径为78.28 mm,小于10℃或大于37℃时较慢。菌丝孢子在pH 5~11条件下均能生长,其中,pH 6时菌丝生长最快,菌落直径最大,为84.62 mm。以葡萄糖、蔗糖作为碳源培养基的菌落直径极显著高于其他处理,分别为63.4、62.2 mm;而乳糖明显不利于其菌丝生长(P<0.01),为33.1 mm,比对照少19.06%。(NH4)2SO4则明显对C913菌丝生长有抑制作用。根据菌株的形态学特征、18S rDNA-ITS序列分析结果,鉴定该菌株C913为半知菌亚门腔孢纲黑盘孢目炭疽菌属的胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides,这是国内外首次在西瓜病叶上发现该病原菌。且温度20~31℃、pH 6时最适菌丝生长,而在温度为25~31℃、pH 9时最适产孢。以葡萄糖、蔗糖为碳源的培养基菌落直径最大,其菌落直径依次为蛋白胨>NaNO3>甘氨酸>谷氨酸>琼脂>(NH4)2SO4。

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