阴沟肠杆菌乳酸脱氢酶基因缺失突变株的构建及其生物学特性

石会玲; 周宇航; 何平; 黄蒙蒙; 邵帅; 葛菁萍; 凌宏志

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阴沟肠杆菌乳酸脱氢酶基因缺失突变株的构建及其生物学特性

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旨在应用自杀质粒重组技术,构建阴沟肠杆菌乳酸脱氢酶突变株,为进一步提高乙偶姻的产量和扩大菌株选择范围奠定基础。利用双酶切的方法将同源片段插入到自杀质粒p KR6K中,构建出ldh基因敲除质粒,然后利用细菌接合的方法敲除E. cloacae的ldh基因。成功克隆出两段E. cloacae乳酸脱氢酶基因的同源序列,长度分别为526 bp,通过序列比对分析,E. cloacae乳酸脱氢酶基因序列相似性为100%。通过对E. cloacae进行乳酸脱氢酶基因的敲除,成功构建一株ldh缺失重组菌株E. cloacae△ldh,同时2,3-丁二醇提高6.8%,乙酸提高了24.3%。E. cloacae乳酸脱氢酶缺失工程菌株构建成功,对利用微生物法工业化生产乙偶姻奠定基础。

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来源
《中国农学通报》 |2021年第23期|29-37|共9页
作者
石会玲; 周宇航; 何平; 黄蒙蒙; 邵帅; 葛菁萍; 凌宏志;
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作者单位

1. 黑龙江大学生命科学学院微生物重点实验室 2. 黑龙江大学农业微生物技术教育部工程研究中心;

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正文语种 chi
中图分类基础理论;基因工程（遗传工程）;
关键词
阴沟肠杆菌; 乳酸脱氢酶; 自杀质粒; 同源重组; 基因敲除;

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