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腺病毒介导的鸟氨酸脱羧酶反义RNA抑制肺癌的实验研究

         

摘要

[目的]探讨研究腺病毒介导的鸟氨酸脱羧酶反义RNA对肺癌的抑制作用。[方法]选择肺癌细胞A-549,采用人鸟氨酸脱竣酶的基因序列扩增引物和扩增腺病毒基因组E1区的引物,对ODC基因片段的克隆,并构建重组体现病毒载体。测定病毒的滴度,并采用MTT法测定病毒对肺癌细胞A-549的抑制作用。[结果]克隆得到了含起始密码ATG的ODC外显子上的一段基因,并可经序列测定,再将这一段基因反向插入腺病毒载体后,也可通过PCR进行初步的鉴定。另外测得病毒的滴度为2.5×108pfu/ml,且通过MTT法测得该病毒对A-549肺癌细胞随作用时间的延长和病毒浓度的增高,抑制作用越强。[结论腺病毒介导的鸟氨酸酶反义RNA对肺癌具有明显的作用,但对其基因治疗的应用还应通过进一步的研究。

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