重组白细胞介素2体外折叠的实验研究

徐明波; 孟文华; 马贤凯

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重组白细胞介素2体外折叠的实验研究

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包涵体中的重组蛋白抽提后可以在变性状态下纯化，而纯化后的体外折叠（即复性）是基因工程下游处埋中的重要环节。荧光光谱研究表明，ＩＬ－２分子折叠过程中荧光强度逐渐减小，最大发射峰由３１６ｎｍ红移到３４８ｎｍ。以Ｔｒｐ残基的暴露程度反映分子的折叠状态。ＧＭ－ＣＳＦ在折叠过程中的荧光强度有类似变化；凝胶排阻ＨＰＬＣ可以检测折叠过程中的聚合体；而反相ＨＰＬＣ可以将ＩＬ－２分成三个相互独立的异构体色谱峰。据此可以计算出ＩＬ－２分子的正确折叠率。常用的稀释复性方法，随着ＩＬ－２浓度的增高，它的正确折叠率逐渐降低，蛋白浓度的对数与正确折叠率之间大致呈线性关系。当ＩＬ－２浓度为１ｍｇ／ｍＬ时，其正确折叠率仅为３０％，而采取较低的蛋白浓度进行复性会因大量的样品体积导致后期纯化的困难。

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来源
《中国生物化学与分子生物学报》 |1994年第3期||共页
作者
徐明波; 孟文华; 马贤凯;
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作者单位

军事医学科学院基础医学研究所;

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正文语种 chi
中图分类免疫分子生物学（免疫化学）;
关键词
重组蛋白; 折叠;

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