菓菠萝蛋白酶的分子构象与活力变化的研究

陈清西; 颜恩旭

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菓菠萝蛋白酶的分子构象与活力变化的研究

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发现CBZ-Lys·pNP能有效地被菓菠萝蛋白酶（Fruit Bromelain E.C.3.4.22.5）作用,测得Km为4.167×10-4mol/L,kcat为742min-1。以荧光和紫外差示光谱为监测手段,对酶分子构象变化进行研究。酶的荧光强度随胍浓度增大而逐渐下降,4mol/L胍变性时,发射峰自332nm红移到353nm,并在310nm处出现新的发射峰。酶的荧光强度都因SDS存在而下降,SDS浓度大于3.47mmol/L有所回升,并出现红移,同时在315nm处出现新的发射肩;紫外差示光谱显示在236nm有一个较显著的员峰,此峰与β-螺旋结构变化有关,278、286和295nm出现三个负峰,260nm有较小正峰,说明酶分子中Tyr、Trp和Phe的微环境发生了明显的变化。测定酶在不同浓度胍和SDS中的变性和失活速度常数,对酶构象变化及催化活力的关系作了比较研究,酶的失活速度均大于变性速度。

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来源
《中国生物化学与分子生物学报》 |1991年第3期|301-307|共7页
作者
陈清西; 颜恩旭;
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作者单位

厦门大学生物学系;

厦门大学生物学系厦门 361005;

厦门 361005;

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正文语种 chi
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关键词
菓萝菠蛋白酶; 变性与失活; 构象与活力;

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