去除无细胞百日咳疫苗丝状血凝素纯化液中内毒素TritonX-114液相分离法的建立及其效果评价

温嘉纳; 王虓宇; 张光贤; 陈林涛; 张晓华; 赵宸; 李娜; 孙明波; 梁疆莉

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目的建立去除无细胞百日咳疫苗丝状血凝素(filamentous hemagglutinin,FHA)纯化液中内毒素的TritonX-114液相分离法,并评价其效果。方法以影响TritonX-114液相分离法效果的TritonX-114加入量、4℃混匀时间、37℃分层时间、25℃16743×g离心时间为试验因素,每个因素设计3个水平,通过正交试验设计12组试验。每组试验获得的样品均检测蛋白回收率,以蛋白回收率最高的条件为最佳。采用最佳条件去除3批无细胞百日咳疫苗FHA纯化液内毒素,检测FHA蛋白含量、内毒素含量及TritonX-114残留量。结果TritonX-114液相分离法最佳条件:TritonX-114加入量为1%,4℃混匀时间为30 min,37℃分层时间为60 min,25℃16743×g离心时间为10 min。最佳条件下去除3批无细胞百日咳疫苗FHA纯化液内毒素后,内毒素含量均<0.25 EU/mL,TritonX-114残留量均值为0.183%,蛋白回收率均值为91.04%。结论TritonX-114液相分离法能够有效去除无细胞百日咳疫苗FHA纯化液中的内毒素,且方法耗时短,操作简便。

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来源
《中国生物制品学杂志》 |2022年第11期|1384-1387|共4页
作者
温嘉纳; 王虓宇; 张光贤; 陈林涛; 张晓华; 赵宸; 李娜; 孙明波; 梁疆莉;
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作者单位

中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所;

云南昆明650118;

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正文语种 chi
中图分类血液与循环生理;
关键词
百日咳疫苗; 内毒素; TritonX-114液相分离法; 丝状血凝素;

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