表达人ABOA1.01等位基因的K562细胞稳定株的构建

邹敏; 陈鸿天; 刘紫葳; 赵晖; 孔文兵; 吕飘; 刘持翔; 周华友

首页> 中文期刊> 《中国输血杂志》 >表达人ABOA1.01等位基因的K562细胞稳定株的构建

表达人ABOA1.01等位基因的K562细胞稳定株的构建

开具论文收录证明 >>

期刊封面封底目录下载 >>

文献代查 >>

页面导航

摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

目的构建稳定表达人ABO~*A1.01等位基因的K562细胞株。方法在载体GV492(Ubi-MCS-3FLAG-CBh-gcGFP-IRES-puromycin)基础上构建ABO~*A1.01等位基因蛋白质编码区(coding sequence,CDS)全长重组质粒GV492-A,将慢病毒重组载体、2种慢病毒包装载体pHelper1.0和pHelper2.0共转染293T细胞做病毒包装;将重组慢病毒感染人慢性髓细胞白血病K562细胞,用嘌呤霉素筛选得到K562-A稳定株,荧光显微镜下观察K562-A稳定株;qPCR检测K562-A稳定株中ABO等位基因mRNA表达水平;对稳定株中的ABO等位基因测序;用流式细胞术检测稳定株细胞表面A抗原的表达情况。结果重组载体测序结果证实成功构建了ABO~*A1.01等位基因重组表达载体;包装慢病毒的滴度适中:ABO~*A1.01等位基因重组慢病毒为1.5E+9 TU/mL,载体GV492对照慢病毒为5.0E+8 TU/mL,说明重组慢病毒包装成功。重组慢病毒载体感染K562细胞后,得到稳定感染细胞株。K562-A稳定株的qPCR检测显示ABO等位基因的mRNA表达水平明显升高(P98%,ABO等位基因测序证实ABO~*A1.01等位基因在细胞内成功转录,流式检测显示细胞表面表达A抗原。结论成功构建表达ABO~*A1.01等位基因的K562-A细胞稳定株,细胞表面表达A抗原。

著录项

来源
《中国输血杂志》 |2018年第12期|1362-1367|共6页
作者
邹敏; 陈鸿天; 刘紫葳; 赵晖; 孔文兵; 吕飘; 刘持翔; 周华友;
展开▼
作者单位

南方医科大学南方医院输血科;

广东广州510515;

展开▼
原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 R457.11;
关键词
K562细胞; ABO~*A1.01等位基因; 慢病毒载体; A抗原;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 携带人OCT4A基因的慢病毒载体的构建及其稳定转染K562白血病细胞株的建立 [J] . 孟凡静 ,曹江 ,周俊 . 中国实验血液学杂志 . 2014,第6期
2. 构建稳定表达RFP及嘌呤霉素抗性的K562细胞株 [J] . 喻琴 ,张赟 ,毕杨 . 医学分子生物学杂志 . 2011,第4期
3. 共表达人Kappa阿片受体与Gq嵌合体GqG66Di5的稳定细胞株构建与鉴定 [J] . 石晶晶 ,张毅 ,陈学军 . 防化研究 . 2023,第2期
4. 稳定表达人热休克蛋白22内皮细胞株的构建和鉴定 [J] . 鲍慧慧 ,陈琦 ,王玲 . 中国组织工程研究 . 2011,第50期
5. 利用慢病毒载体构建过表达人TCRP1基因的慢性髓系白血病K562细胞系及其生物学功能检测 [J] . 刘孝荣 ,何悦 ,陈妍 . 实用医学杂志 . 2023,第19期
6. 稳定表达TGEV N蛋白的ST细胞株的构建及其亚细胞定位 [C] . 何雷 ,HE LEI ,YUCHUAN . 河南省畜牧兽医学会暨饲料饲草学分会2015年度学术交流会 . 2015
7. C1GALT1稳定过表达人胃癌细胞株的构建及其生物学特性的初步观察 [A] . 伍雅倩 . 2020

表达人ABOA1.01等位基因的K562细胞稳定株的构建

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅