一种新的实时荧光定量PCR方法对血小板制品细菌污染检测效果的评价

边国慧; 杨春晖; 高瞻; 徐敏; 何苗

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一种新的实时荧光定量PCR方法对血小板制品细菌污染检测效果的评价

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目的建立一种自主研发的针对细菌16 S r DNA基因的实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法并评价该方法对浓缩血小板制品中细菌污染检测的效果。方法设计16S r DNA基因保守区引物,构建SYBR Green Real-time PCR反应体系;然后分别将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌和绿脓杆菌以初始浓度为1CFU/m L、10 CFU/m L和100 CFU/m L接种到浓缩血小板中,经22℃保存7 d后,用实时定量荧光PCR方法进行细菌检测。结果细菌污染后的血小板在常规保存条件下,最长保存期<7 d,不同接种浓度的细菌生长情况的变化趋势基本一致,所有种类的细菌均在d 1、2表现出迅猛的增殖高峰,d 3以后增殖趋于平缓。结论该Real-time PCR检测体系可定量地检测出血小板的细菌污染的情况,可适用于血小板输注前的快速细菌污染检测。

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来源
《中国输血杂志》 |2015年第4期|387-390|共4页
作者
边国慧; 杨春晖; 高瞻; 徐敏; 何苗;
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作者单位

中国医学科学院北京协和医学院输血研究所;

四川成都610052;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类球菌;输血疗法;
关键词
浓缩血小板; 细菌污染; 实时荧光定量PCR; 16S; rDNA; SYBR; Green;

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