水牛抑制素α亚基基因的克隆与原核表达

谢体三; 农微; 张新民; 黄雅琼; 崔奎青; 石德顺

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水牛抑制素α亚基基因的克隆与原核表达

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摘要

采用RT-PCR方法从水牛卵巢总RNA中扩增抑制素α亚基基因,并克隆入pMD18-T载体,进行PCR、双酶切及测序鉴定。序列分析结果表明:水牛抑制素α亚基基因编码序列长为1083 bp,编码360个氨基酸,与牛、人、猪抑制素α亚基基因CDS成熟蛋白氨基酸的同源性分别为96%、80%、87%,表明抑制素α亚基是一组在进化上高度保守的蛋白质。将水牛抑制素α亚基基因CDS克隆到pET-30a表达载体中,转化宿主菌BL21(DE3)进行原核表达。在1 mmol/L IPTG中,37℃诱导表达4 h后抑制素α亚基基因重组蛋白可成功获得表达。将表达产物进行SDS-PAGE分析,结果表达产物主要以包涵体形式存在,分子质量约为40 ku。

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来源
《黑龙江畜牧兽医》 |2009年第8期|14-17|共4页
作者
谢体三; 农微; 张新民; 黄雅琼; 崔奎青; 石德顺;
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作者单位

广西大学动物繁殖研究所;

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正文语种 chi
中图分类 S823.83;
关键词
抑制素α亚基; 水牛; 原核表达;

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