环介导逆转录等温扩增技术(RT-LAMP)在丙型肝炎病毒基因检测中的应用

李启明; 马学军; 周蕊; 彭夫望; 高寒春; 匡治州; 侯云德

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该文介绍了一种便捷、灵敏而又特异的环介导逆转录等温扩增基因检测技术，该技术分别使用特异对应于靶序列中8个基因区段的3对特殊引物，并在反转录酶和Bst-DNA聚合酶的作用下对靶序列进行等温核酸扩增反应，整个检测反应只需1～2h。利用这种技术成功检测了丙型肝炎病毒基因，对60份经Real-timePCR或RT—-PCR验证阳性的血清样品检测，阳性符合率为98％。同时，对扩增终产物进一步进行酶切分析，并与HIV、HBV和不同亚型流感病毒RNA进行交叉反应和特异性测试，均与预期结果吻合。将Real-timePCR定量后的RNA系列稀释后对检测方法的灵敏度进行了测试。结果显示，该技术的检测灵敏度在理论上可达到10个拷贝的RNA分子。以上结果证明，RT-LAMP扩增技术是一种检测程序简单、灵敏度和特异性较高的基因检测手段，在丙型肝炎病毒的快速检测方面具有一定的开发潜力。

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来源
《病毒学报》 |2006年第5期|334-338|共5页
作者
李启明; 马学军; 周蕊; 彭夫望; 高寒春; 匡治州; 侯云德;
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作者单位

中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所;

北京金迪克生物技术研究所;

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正文语种 chi
中图分类 R373.21;
关键词
丙型肝炎病毒; 环介导逆转录等温扩增; 实时监控聚合酶链反应;

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