肠球菌TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

任月; 袁杰利; 卢行安; 岳慧

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肠球菌TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

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目的利用TaqMan荧光定量PCR方法,建立肠球菌实时荧光PCR检测方法,并初步应用于粪便中肠球菌的检测。方法根据GenBank发表的肠球菌23S rRNA基因序列的保守区域参考国外文献设计合成特异性的引物和探针[1];利用构建的质粒标准品优化Mg2+的浓度和引物探针浓度,并考核检测体系的保守性、灵敏性和重复性;初步应用于粪便标本的检测分析。结果Mg2+终浓度为4.5 mmol/L,上下游引物终浓度为0.4μmol/L,灵敏度为6拷贝数/反应;绘制两种标准曲线,构建了基因拷贝数、细菌数为分析指标的定量分析模型,检测粪便标本结果显示TaqMan荧光定量PCR方法较平板计数法敏感、快捷、简便。结论本研究建立了一种灵敏、特异、简便易行的肠球菌定量检测方法。

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来源
《中国微生态学杂志》 |2007年第5期|413-416|共4页
作者
任月; 袁杰利; 卢行安; 岳慧;
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作者单位

大连医科大学微生态教研室;

辽宁出入境检验检疫局;

宁夏大学农学院;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 R378.992;
关键词
肠球菌; 荧光定量PCR; 粪便;

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