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不同冷冻剂对鸡胚PGCs的保护效应

         

摘要

发育至第19期和第28期的鸡胚性腺原始生殖细胞(PGCs)分离提纯后,在DMEM中添加冷冻保护剂DMSO(二甲基亚砜)、EG(乙二醇)、蔗糖进行超低温冷冻保存,比较冷冻保护剂在单独或联合使用条件下对PGCs的冷冻保护效果,复苏后台盼蓝染色测定细胞存活率,体外接种培养、传代。结果表明:(1)第19期PGCs冷冻保存中,10% EG+10% FBS+0.1mol/L蔗糖条件下细胞存活率最高为(92.20±2.18)%,且与10% DMSO+10% FBS的存活率差异显著(P0.05)。(2)解冻后体外培养的PGCs,在饲养层和3种细胞因子(LIF、SCF、bFGF)的共同作用下,可持续增殖,传至第3代的PGCs,PAS染色、AKP染色均呈阳性并保持完整的二倍体核型,仍处于未分化状态。

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