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丝状真菌DNA抽提方法的比较

         

摘要

目的寻找一种针对产孢少的丝状真菌简单、有效的DNA抽提方法。方法以红色毛癣菌和须癣毛癣菌为代表菌株,分别用改良后的氯化苄法及小量酵母DNA试剂盒(裂解酶+蛋白酶K)法抽提基因组DNA,并对所抽提DNA的质量及稳定性进行比较研究。结果氯化苄法抽提的皮肤癣菌DNA片段均>21 kb,每克菌丝体的DNA产量均>25μg。小量酵母基因组DNA试剂盒法抽提DNA,初步估测1.0×109/mL孢子菌丝混悬液的DNA得率仅约为0.6μg。采用氯化苄法抽提保存3年的皮肤癣菌基因组DNA仍能很好地适用于聚合酶链反应(PCR)扩增。结论采用氯化苄法抽提丝状真菌的DNA得率和纯度均较高,而且稳定性好,推荐用于产孢少、生长缓慢的丝状真菌DNA的抽提研究。

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