应用RD-PCR技术制备HIV基因芯片探针

李凌; 马文丽; 祝骥; 朱利娜; 宋艳斌; 吴清华; 郭秋野; 郑文岭

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应用RD-PCR技术制备HIV基因芯片探针

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利用限制性显示 (RD PCR)技术快速分离HIV 1基因片段制备DNA芯片探针 .以Sau3AⅠ酶切HIV基因 ,得到许多大小适合芯片的限制性酶切片段 .然后在片段两端接上接头 ,根据酶切位点、接头的序列设计通用引物 .在该通用引物的 3′端分别延伸一个碱基后 ,通过引物间的两两组合 ,将PCR反应分成 10个亚组 .纯化各组PCR产物 ,克隆到T载体上 .阳性克隆经鉴定、扩大培养后提取质粒 .以质粒为模板扩增靶片段并进行序列分析 .每个亚型得到了十几个 10 0～ 10 0 0bp的HIV基因片段 .研究表明 ,RD

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来源
《中国生物化学与分子生物学报》 |2002年第1期|105-109|共5页
作者
李凌; 马文丽; 祝骥; 朱利娜; 宋艳斌; 吴清华; 郭秋野; 郑文岭;
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作者单位

第一军医大学分子生物学研究所;

广州总医院分子肿瘤学研究所;

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正文语种 chi
中图分类其他病毒;基因工程（遗传工程）;
关键词
RD-PCR; HIV; DNA芯片; 基因芯片探针; 制备;

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