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用gfp报告基因检测土壤中Cu^(2+)对饭豆根瘤菌生物毒性的研究

         

摘要

利用绿色荧光蛋白基因 gfp标记研究了土壤中Cu2 + 胁迫对饭豆 (VignaumbellateL .)根瘤菌JMC14 0 2G腐生存活和共生固氮能力的影响。研究结果表明 :在液体培养条件下 ,向培养基加入 1μg/mL的Cu2 + 时 ,JMC14 0 2G的生长受到轻微抑制 ;当Cu2 + 浓度达到 5 μg/mL和 7μg/mL时 ,JMC14 0 2G的生长受到严重抑制 ;当Cu2 + 浓度达到 10 μg/mL时 ,JMC14 0 2G已不能生长。在灭菌土壤中Cu2 + 添加量小于 2 0 0mg/kg时 ,JMC14 0 2G数量在 37d内能保持在 1.74× 10 5cfu/g以上 ,当土壤中Cu2 + 添加量达到 5 0 0mg/kg时 ,在接种后第2天其数量已降至 10 2 cfu/g以下。在未灭菌土壤中 ,当Cu2 + 添加量在 0~ 80mg/kg范围内时 ,JMC14 0 2G的数量在接种后 2 3d已由 10 8cfu/g降至 10 4~ 10 5cfu/g ,随着Cu2 + 添加量的进一步增大 ,其菌数迅速下降到 10 4cfu/g以下。饭豆盆栽试验结果表明 :Cu2 + 添加量在 0~ 80mg/kg范围内对JMC14 0 2G共生固氮的影响并不大 ,当土壤中Cu2 + 添加量达到 12 0mg/kg时 ,对JMC14 0 2G产生较明显的生理毒性 ,当Cu2 + 添加量达到 30 0mg/kg时 ,JMC14 0 2G失去结瘤能力。

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