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青天葵组培物超低温保存研究

         

摘要

目的用超低温方法保存青天葵组培物。方法采用单因子比较法、均匀设计法考察生长周龄、冷冻保护剂、预培养时间、降温方式、化冻方式等因素对青天葵组培物超低温保存后细胞生活力的影响。结果青天葵组培物较佳的超低温保存程序为:5周龄的组培物,在4℃进行低温锻炼12 d,以12.5%DMSO+0.25%LH为冷冻保护剂,在4℃静置处理30 m in,然后在-18℃,停留1 h后投入液氮中保存,材料取出后,在20℃化冻,无菌洗涤后,再接种,组培物能够存活并继续生长。结论超低温保存方式可以成功保存青天葵组培物种质资源。

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