EB病毒潜伏膜蛋白1对鼻咽癌细胞体外转移能力影响

刘雄; 彭英; 李刚; 张宝; 李晓华; 周立辉; 李湘平

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EB病毒潜伏膜蛋白1对鼻咽癌细胞体外转移能力影响

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目的探讨EB病毒（epstein-barr virus,EBV）潜伏膜蛋白1（Iatent membrane protein1，LMP-1）对鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）细胞体外转移能力的影响。方法设计针对EBV-LMP-1的特异性发夹状RNA（small hairpin RNA，shRNA）干扰序列，构建2种重组腺相关病毒（recombinant adeno—associated virus，rAAV）载体：rAAV-增强型绿色荧光蛋白（enhance green fluorescent protein，EGFP）和rAAV-shRNA—LMP-1，以不同滴度rAAV-EGFP转染鼻咽癌C666—1细胞确定最佳转染效率（multiplicity of infection，MOI），rAAV-shRNA-LMP-1按MOI转染C666-1，RT-PCR鉴定抑制效率，划痕试验和基底膜穿透试验检验细胞转移能力的变化。结果以rAAV-EGFP5×10^4v．g（virus genome，病毒基因组数），细胞转染C666—1细胞，转染效率大于95％，RT-PCR鉴定rAAV-shRNA—LMP-1以5×10^4v．g／细胞转染C666-1后目的基因抑制效率大于90％，划痕试验显示在相同的时间内，越过划痕边缘移动到空白处的细胞数明显减少（P〈0．01），基底膜穿透试验提示细胞穿透能力显著下降（P〈0．001）。结论通过rAAV介导RNA干扰能有效抑制LMP-1基因表达，并显著抑制了肿瘤细胞的运动及穿透转移能力。

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来源
《中国耳鼻咽喉头颈外科》 |2008年第11期|615-619|共5页
作者
刘雄; 彭英; 李刚; 张宝; 李晓华; 周立辉; 李湘平;
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作者单位

南方医科大学南方医院耳鼻咽喉头颈外科;

中山大学第二附属医院神经内科;

南方医科大学分子生物教研室;

解放军第九四医院耳鼻咽喉科;

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正文语种 chi
中图分类耳鼻咽喉肿瘤;咽肿瘤;
关键词
鼻咽肿瘤; 依赖病毒; RNA干扰; 肿瘤转移; 潜伏膜蛋白1;

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