重组CFP10-ESAT6蛋白通过TLR信号介导A549细胞抗BCG感染

刘占有; 徐兆坤; 王健宏; 李武

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重组CFP10-ESAT6蛋白通过TLR信号介导A549细胞抗BCG感染

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本研究旨在探究重组CFP10-ESAT6蛋白在结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)感染肺泡上皮细胞过程中对肺泡上皮细胞TLR信号途径及其介导的炎症反应的影响。利用原核表达系统表达纯化Mtb重组蛋白CFP10-ESAT6,使用重组蛋白处理A549细胞,利用CCK-8试剂盒检测重组CFP10-ESAT6对细胞活性的影响;使用重组CFP10-ESAT6和减毒牛分支杆菌BCG处理细胞并设置相应组别,提取细胞总RNA和总蛋白,利用qRT-PCR技术、Western-blot及ELISA方法分别从转录和翻译水平检测A549细胞中TLR信号途径关键分子及其下游炎症因子的表达变化。结果显示,成功获得高纯度的重组CFP10-ESAT6,并且重组CFP10-ESAT6在一定浓度范围和处理时间条件下能够降低A549细胞的存活率。当BCG或重组CFP10-ESAT6单独处理A549细胞时,细胞中TLR2、TLR4、My D88、TRAF6和NF-κB p65及下游炎症因子IL-6和TNF-α的表达水平显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)上调,重组CFP10-ESAT6与BCG共处理时,重组CFP10-ESAT6显著(P<0.05)降低了由BCG刺激所导致的TLR途径关键分子TLR2、TLR4、My D88、TRAF6、NF-κB p65、IL-6及TNF-α等炎症因子的表达水平。上述结果表明,重组CFP10-ESAT6可以减轻A549细胞在抗Mtb感染过程中由TLR信号介导的炎症因子的分泌,这将为进一步加深理解结核病发病机制提供理论依据。

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来源
《中国兽医科学》 |2021年第4期|500-508|共9页
作者
刘占有; 徐兆坤; 王健宏; 李武;
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作者单位

宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室;

宁夏银川750021;

宁夏大学生命科学学院;

宁夏银川750021;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 S852.618;
关键词
结核分支杆菌; 重组CFP10-ESAT6蛋白; TLR信号途径; 肺泡上皮细胞; 炎症因子;

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